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在感染病毒的马铃薯植株体内，病毒的分布并不均匀，越靠近分生区的部位病毒的含量越低。这是因为病毒通过维管束和胞间连丝进行传播，在植株分生区内维管束暂未成型，病毒扩散慢，加之植物细胞不断分裂增生，所以病毒含量极少，在分生区的生长点几乎检测不出病毒，因此切取的茎尖愈小愈好，切取的茎尖通过培养基培养、分离、检测无毒后进行扩繁。
（一）材料选择
茎尖组织的培养目的是脱掉病毒。而脱毒效果与材料的选择关系很大。马铃薯品种发生病毒性退化，植株间感染病毒轻重、有无，往往差别很大，感染病毒重的常常是病毒复合侵染，如有的被病毒和Y病毒侵染或3~4种病毒侵染。感染病毒轻的可能被1种病毒侵染，还有的接近于健康的植株。所以在选择脱毒材料时，除应选取具有该品种典型性状的植株外，还要选取植株中病症最轻的或健康的植株。
选取的这些植株作茎尖培养时，可直接切取植株上的分枝或腋芽进行茎尖剥离培养，也可取这些植株的块茎，待块茎发芽后剥取芽的生长点（生长锥）进行培养。不论取材健康程度如何，都应在取用前进行纺锤块茎类病毒（PSTV）及各种病毒检测，以便决定取舍及对病毒的全面掌握。在病毒检测时有的品种在种植过程中因感病毒机会少，或种植时间短，可能有的植株无病毒，仍保持健康状态，经检测后确定无病毒，即可作为无病毒株系扩大繁殖，免去脱毒之劳。
（二）病毒检测
目前生产上推广的品种，或多或少有被马铃薯纺锤块茎类病毒侵染的可能。作为茎尖培养的材料，首先用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对纺锤块茎类病毒进行检测，发现有此病毒存在，应坚决淘汰。因为茎尖脱毒一般不能脱去此种病毒。只有在无纺锤块茎类病毒时，才对其他病毒检测。可用血清法、电镜法、生物指示植物等方法，检测材料带病毒种类，进行登记编号，培养后再进行检测。剥取茎尖是在无菌室内超净工作台上进行的。
为了防止杂菌感染，应对无菌室消毒。用5％的石炭酸水喷雾消毒，并用紫外线灯照射0.5h以上。关灯20min后工作人员方可入室（开关应设在无菌室外），以防影响人身健康。超净工作台应事先打开，0.5h后工作。工作人员进入无菌室前，应将手表、手镯、戒指、项链等放在室外，换上消毒工作服、鞋、帽和口罩。把手和手腕用肥皂洗净后才能进入无菌室，并用74％的酒精棉球擦拭手和工作台的各种用具，而后开始工作。
剥取茎尖可用植株分枝或腋芽，但大多采用块茎上发出的嫩芽，因为植株的腋芽不易彻底消毒，容易污染。块茎幼芽长4cm左右，幼叶未开展时切取（不可切用老芽，老芽易分化为花芽），对切取的芽段，先进行消毒。把芽段放入烧杯中，用纱布把口封住，放在自来水池中冲洗3min，取出后在75％的酒精中蘸一下，放入5％的次氯酸钠溶液中浸20min，再蒸馏水冲3~4次，即可拿到无菌超净工作台上剥取茎尖。
在超净工作台上，将芽段置于30~50倍的双目解剖镜下，用解剖针一层一层地小心剥去顶芽的小叶片，待露出1~3个叶原基的生长锥后，用解剖刀把带有1~3个叶原基的生长锥（0.2~0.4mm）切下，立即接种到试管内营养基上，每个试管只接种1个茎尖，并在试管上编号以便检查。接种完后应登记接种时间、品种、管数、原茎尖带病毒种类等。剥离茎尖、接种使用的解剖刀、解剖针等要求严格消毒。
一般都配备2套，放酒精杯中，用时取出，用后在酒精灯上烧一下，然后还放酒精杯中，剥离1个茎尖应换1次解剖刀和解剖针，轮流使用，严格消毒，防止杂菌污染。4.茎尖培养接种茎尖的试管，应放在培养室内进行培养，培养室温度保持在20~25℃，光照强度3000lx，每天16h，以日光灯作为光源。2周后茎尖生长点便明显增长变绿。随着茎尖的增长，45d后根据情况将其转移到新的无调节剂的培养基上，茎尖便可逐渐生长成新的小苗。待小苗长到4~5节时，进行单节切段接种到三角瓶内培养基上，注明编号。
经过30d左右再把三角瓶内的小苗单节切段接种到3~4个三角瓶中培养基上。待苗长高10cm左右，直接取2~3瓶进行病毒检测或栽人温室进行病毒检测留1瓶（同样编号）保存在培养室内。经病毒检测确定不带任何病毒，方可确定为无毒苗，才能加速快繁利用。凡检测出有病毒的茎尖小苗应坚决淘汰，同时将培养室保存的同样编号的茎尖苗也立即淘汰。茎尖培养可分两个阶段进行，第一阶段用S培养基加赤霉素0.1mg/L、6-苄基腺嘌呤0.05mg/L、萘乙酸0.1mg/L的培养基，培养2~3周后茎尖明显增长，转入第二阶段培养；第二阶段，把茎尖转入MS培养基上，不加任何生长激素，保持温度20~25℃，光照强度3000lx，经1~2个月逐渐长成小植株。
（1）茎尖接种后生长锥不生长或生长锥变褐后死亡。这是因为在剥离茎尖时生长点受伤，接种后不能恢复而死亡。所以，在剥离茎尖时一定细心，解剖针尖不能碰伤生长点。（2）培养过程中茎尖生长缓慢，接种1个月只一点绿色，而不生长。这是培养基萘乙酸浓度不够，应转入萘乙酸含量加大到0.5mL/L以上的培养基上，并把温度提高到25℃左右，促进茎尖生长。（3）生长锥生长基本正常，茎尖基部出现愈伤组织或不生根，这时应把茎尖转入无生长激素的培养基上，并将室温降到18~20℃，以促进根的分化。（4）茎尖愈小形成愈伤组织的概率愈大，分化成苗的时间愈长，一般需经过4~5个月。切的茎尖0.2~0.3mm长，成苗的时间约3个月，因品种不同而有差别，有的需经7~8个月才能成苗。形成愈伤组织后分化出的苗，往往发生遗传变异。这种茎尖苗应通过品种典型比较，证明没有变异才能按原品种应用推广。
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