【摘要】：研究一周婉瑜教授从络治疗葡萄膜炎的临床经验挖掘目的 运用中医传承辅助平台分析周婉瑜教授从络治疗葡萄膜炎的用药规律,挖掘治疗葡萄膜炎的核心方,并对其临床经验进行详细探讨。方法 本研究采用回顾性研究方法,按照纳、排标准筛选中国中医科学院西苑医院2019年5月-2020年10月周婉瑜教授门诊治疗的葡萄膜炎的病例资料,汇总患者信息、辨证分型、处方用药、药物剂量等,建立入组病例资料数据库。将病例资料中中药名称进行统一,并规范证候名称、拆分证候要素。将规范处理的数据录入到中医传承辅助平台软件的临床采集系统(2.5版本),采取双人双录入的形式,应用中医传承辅助平台“统计报表”模块对证候要素、药物频次、药物四气、五味及归经分布等进行统计分析;应用“数据分析”模块,分析药物组合出现频次及关联度,进一步得出新方药物组合,提取核心方。结果1 一般资料分析:入组病例资料中共筛选患者107例,其中男性43例,女性64例,男:女=1:1.49,平均年龄为41.02岁。107例患者中,前葡萄膜炎47人,全葡萄膜炎47人,后葡萄膜炎9人,中间葡萄膜炎4人。2病位、病性要素统计:共提取病位要素4个,病性要素9个。
病位要素以肝为主,其次为肾、脾、心;病性要素属实证的有火/热、湿热、风热、风湿、痰瘀、络阻,其中以火/热为主;属于虚证的病性因素有阴虚、气虚、阳虚,其中以阴虚为主。3药物使用频次统计:病例资料中225首处方共涉及160味中药,所有中药共使用频次为3540,使用频次前10位依次是当归、白术、百合、甘草、金银花、玄参、茯苓、黄芪、徐长卿、川芎,使用频次在36以上的药物有27味。4四气、五味、归经分布:药物四气分布频次中:寒、温、平最高,凉、热次之;药物五味分布频次中:甘味、苦味、辛味最高;药物归经分布频次中:肺、心、肝、脾最高,胃、肾次之。5药物组合统计:取支持度个数为92,共得到64个常用药物组合,共包含药物10味,包括金银花、玄参、当归、甘草、茯苓、白术、百合、黄芪、徐长卿、川芎。设置置信度为0.95,对药物组合进行关联规则分析,置信度最高的药物组合20个;选择相关系数为5,惩罚系数为2,应用熵聚类方法的新处方分析,得到新处方3个。提取周婉瑜教授治疗葡萄膜炎的核心处方四妙勇安汤,即:金银花、玄参、当归、甘草。结论 基于络病理论,湿、火、瘀是葡萄膜炎发病的基本病理因素,湿、火、瘀久蕴化毒、郁滞目络是葡萄膜炎发病的病理过程,毒损目络是核心病机。
周婉瑜教授治疗葡萄膜炎以益气活血、解毒通络为基本法则,以四妙勇安汤为治疗本病的核心方;在遵循“络以通为用”的原则基础上,提出“通络”当以气血为先的思想,注重培扶正气和养心安神之法;用药特点可概括为:辛开苦降、辛温通络和寒温并用,善用对药和角药。研究二核心方治疗葡萄膜炎作用机制的网络药理学研究目的 运用网络药理学的方法,研究四妙勇安汤药物有效成分、作用的主要靶点和通路,预测四妙勇安汤治疗葡萄膜炎的作用机制。方法 利用TCMSP数据库检索核心方四妙勇安汤中“金银花、玄参、当归、甘草”的所有化学成分,对检索得到的化学成分以口服生物利用度及类药性为筛选阈值标准,建立四妙勇安汤的药物-化合物-靶蛋白数据库。在Uniprot数据库中UniProtKB区域下载人源靶蛋白基因数据库,并对已筛选的靶蛋白进行标准化,建立四妙勇安汤的药物-化合物-基因靶点数据库。以“葡萄膜炎”的英文名“Uveitis”为关键词在GeneCards、OMIM及CTD数据库库中检索,将检索结果合并,筛重后得到Uveitis相关靶点。将药物作用靶点与疾病靶点取交集,将上述得到的交集靶点导入STRING数据库,蛋白种类设置为“Homo sapiens”,其余参数均保持默认,构建PPI网络图,并导入Cytoscape3.7.1软件,进一步利用其“Network Analysis”功能进行网络拓扑属性分析。
根据节点度值分布和节点紧密度2个重要网络拓扑参数进行筛选,再次构建PPI网络,选取两者同时在平均值之上的靶点作为四妙勇安汤治疗葡萄膜炎的核心靶点。利用Metascape数据库在线对核心靶点进行分子功能、生物过程、细胞组成富集分析和KEGG通路富集分析。结果1药物活性成分及作用靶点:提取金银花主要活性成分23种,作用靶点225个;玄参主要活性成分9种,作用靶点49个;当归主要活性成分2种,作用靶点53个;甘草主要活性成分92种,作用靶点129个。4味中药有5个活性成分重复,去重后共有121个活性成分。2疾病相关靶点的获取:从CTD数据库中获取21565个相关靶点,从OMIM数据中获取99个相关靶点,从GeneCard数据库中获取相关靶点1057个,将检索结果合并去重,将Inference Score≧ 14.59为筛选标准,得到Uveitis疾病相关靶点646个。3核心靶点的提取:将药物活性成分靶点和葡萄膜炎疾病靶点取交集,得到共同靶点105个,导入STRING平台,得到蛋白质互作(PPI)网络,将PPI网络导入Cytoscape软件中,根据网络拓扑参数中位数提取核心靶点53个。4基因本体分析与通路的富集分析:应用Metascape平台分别对核心方治疗葡萄膜炎的核心靶点进行KEGG信号通路富集分析、GO富集分析,参数均设置为默认,得到KEGG通路137条,GO-BP生物过程1633条,GO-CC细胞组成31条,GO-MF分子功能85条。
结论 根据网络药理学结果预测AKT1、TP53、MAPK3、VEGFA、TNF为四妙勇安汤治疗葡萄膜炎的主要靶点;槲皮素、山奈酚、木犀草素为四妙勇安汤发挥作用的主要成分;乙肝病毒通路、TNF信号通路、IL-17信号通路、弓形虫病通路、Toll样受体信号通路、Th17细胞分化通路、甲型流感通路、HIF-1信号通路通路、百日咳通路、结核通路、细胞凋亡通路、PI3K-Akt信号通路、NOD样受体信号通路可能是四妙勇安汤治疗葡萄膜炎的主要通路。研究结果预测四妙勇安汤可通过多成分、多通路、多靶点的整体综合调节来治疗葡萄膜炎。
发表评论